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Proteinkonzentrationsrechner (A280)

Bestimme die Konzentration einer gereinigten Proteinprobe basierend auf ihrer Absorbanz bei 280 nm, dem molaren Extinktionskoeffizienten und dem Molekulargewicht.

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Proteinspektrophotometrie

Gib Absorbanz, Extinktionskoeffizient, Schichtdicke und Molekulargewicht an.

Absorbanz bei 280 nm (A₂₈₀)

Extinktionskoeffizient (ε) (M⁻¹cm⁻¹)

Küvetten-Schichtdicke (cm)

Molekulargewicht (MW) (kDa)

Proteinkonzentration

0.27 mg/ml

* Entspricht 0.27 g/l.

Molarität (M) 1.81e-5 M (18.1 μM)

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Experten-Tipp

Die Absorbanz bei 280 nm hängt stark vom Vorhandensein aromatischer Reste (Tryptophan, Tyrosin und Cystinbindungen) ab. Für Proteine ohne diese sind kolorimetrische Assays (z. B. BCA oder Bradford) erforderlich.

Methodik & Gleichungen

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Beer-Lambert Molarität

Die Molarität wird anhand der spektrophotometrischen Gleichung von Beer-Lambert berechnet:

Molarität (M) = A280 / (ε * L)

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Massenkonzentration

Umgerechnet aus der Molarität unter Verwendung des Molekulargewichts (MW, wobei g/mol = Da):

Konzentration (mg/ml) = Molarität (M) * MW (kDa) * 1000

Proteinkonzentration aus A280 berechnen: Schritt-für-Schritt

Die Absorption bei 280 nm (A280) dient zur Quantifizierung von Proteinen basierend auf aromatischen Aminosäuren:

Absorption bei 280 nm messen

Ermittle den A280-Wert Ihrer Proteinprobe.

Extinktionskoeffizienten bestimmen

Finde den produktspezifischen Koeffizienten (z. B. für IgG = 1.37 mL/mg*cm) oder nutze das Molekulargewicht.

Konzentration berechnen

Nach dem Lambert-Beerschen Gesetz gilt: Konzentration (mg/mL) = A280 / Extinktionskoeffizient.