A260-Absorbanz-in-Konzentration-Rechner
Rechne die UV-Absorbanz bei 260 nm (A260) in die Konzentration von dsDNA, ssDNA oder RNA um. Konzipiert für Küvetten-Spektrofotometermessungen mit anpassbaren Verdünnungsfaktoren und Schichtdicken.
Messwerte
Gib Absorbanz, Nukleinsäure-Typ und Verdünnung an.
Nukleinsäure-Konzentration
* Entspricht 25.0 ng/μL.
Experten-Tipp
Stelle sicher, dass dein A260-Messwert im linearen Bereich des Spektrofotometers liegt (normalerweise 0,1 bis 1,0 OD). Wenn der Wert zu hoch ist, verdünne die Probe und passe den Verdünnungsfaktor entsprechend an.
Methodik & Gleichungen
Anwendung des Lambert-Beerschen Gesetzes
Die Absorbanzspektroskopie setzt die Lichtabschwächung in Beziehung zur Konzentration des gelösten Stoffes:
Standard-Konvertierungsfaktoren
Bei einer Wellenlänge von 260 nm entspricht eine optische Dichte (OD) von 1,0 folgenden Massenkonzentrationen:
- dsDNA: 50 μg/mL (oder ng/μL)
- ssDNA: 33 μg/mL (oder ng/μL)
- RNA: 40 μg/mL (oder ng/μL)
Umrechnung der A260-Absorption in Konzentration: Schritt-für-Schritt
Bestimme die Konzentration von Nukleinsäuren mittels UV-Spektrophotometrie bei 260 nm:
A260-Wert ablesen
Ermittle die Absorption deiner Probe bei 260 nm.
Standardkonstanten wählen
Faktor = 50 µg/mL für Doppelstrang-DNA (dsDNA), 33 µg/mL für Einzelstrang-DNA (ssDNA) oder 40 µg/mL für RNA.
Konzentration berechnen
Multipliziere: Konzentration = A260 × Konstante × Verdünnungsfaktor.
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